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今年2月13号一篇冻卵推文炸出来了2个冻卵群，还有300多个读者，大家都在等我做功课，我中间辞职创业业务刚上正轨，这篇文章前半部分是我在米兰学习橙湾大学组织的游学课程中间抢时间写的，后半部分刚刚刚完成。这些冻卵功课一拖二拖拖到了现在，要跟大家道个歉先。

从这篇开始，我会尽量在年底之前把我做过的功课都陆续写出来。

第一篇功课就写一下冻卵整个医疗过程是怎么一回事。

1. 冻卵的过程是如何完成的？

A 把卵子冻在哪儿？

冻卵，即利用细胞深低温冷冻保存技术，将卵子采用特殊的保护剂和降温措施放置在的液氮中冷冻。冷冻使其代谢停止或者减弱到足够小的程度，但又不失去升温后恢复代谢的能力，从而能长期保存生物材料的一种技术。-196 ℃（液氮）是最佳冷冻保存温度。

B 怎么冻？

玻璃化冷冻法（ Vitrification ）

（ 1 ）定义及方法

“玻璃化”是指当水或溶液快速降温达到或低于 -100 ～ -110 ℃的温度范围时，形成一种具有高黏度的介于液态和固态之间的、非晶体态的、杂乱无章的、透明的玻璃状态。在玻璃化过程中，分子不重新排列，不发生剧烈运动，没有准确、固定的转变固化点。当水溶液含有电解质或其他可溶性成分转变成玻璃态时，由于其均一的分散系统未遭到破坏，所以溶液的浓度不发生改变或改变很小。

玻璃化冷冻法的基本原理是将高浓度的冷冻保护剂在超低温环境下凝固，形成不规则的玻璃化样固体，保存了液态时正常分子和离子分布，因而在细胞内发生玻璃化时能起到保护作用。所保存细胞在冷冻保护液中脱水到一定程度后，则引起内源性胞质大分子如蛋白质及渗透到胞内的冷冻保护剂浓缩，从而使细胞在剧烈的快速降温中得到保护。

玻璃化冷冻技术的特色就是使细胞本身及冷冻溶液在冷冻时，呈现黏稠而不产生结晶的玻璃化状态，利用这种不结冰的原理以改善慢速冷冻之缺点。

玻璃化冷冻过程中会受到诸多因素影响：冷冻保护剂的类型和浓度、玻璃化冷冻液的作用温度、细胞与投入液氮前与保护剂的接触时间、冷冻过程中的承载工具、细胞的发育阶段和质量等。

（2）方法要求：

高浓度冷冻保护剂，使脱水卵子及外周的溶液以每分钟 20000 ℃左右速度快速降温到玻璃态。该冷冻效果目前认为是最好的。

C 冻卵技术成熟吗？

国际：

1953年，人类首次冷冻精子成功，30年后也就是1983年，人类冷冻胚胎第一次成功受孕，直到了1986年，澳大利亚的克里斯托弗·陈医生（Dr Christopher Chen）才报告了世界上第一例使用冷冻卵子成功受孕的病例。1997 年报道了第 1 例冻融卵母细胞经卵母细胞内单精子注射（ ICSI ）技术出生的婴儿等。

从目前冷冻卵子在世界各国的应用来看，很多计划推迟生育的女性未必能享受到这项生育保鲜技术。因为在多数国家，冷冻卵子技术是有严格的适用对象的，通常都是出于医学需求，作为一种治疗措施出现：

的，通常都是出于医学需求，作为一种治疗措施出现：

· 有生育障碍需要做人工受精的

· 被诊断为癌症可能需要放化疗，会损害生殖系统功能的

· 有家族性卵巢早衰史的

除此之外，能够为没有生育障碍，只是想要延长生育期限的单身女性或是夫妇提供冷冻卵子服务的国家只有：美国、英国、日本、西班牙。当然，女性推迟婚育年龄，已经变得越来越越普遍，随之而来生育问题也使得很多国家考虑放宽冷冻卵子的申请条件。譬如日本的生殖医学伦理委员会就是在2013年8月才允许40岁以下单身女性申请冷冻卵子的。据悉，新加坡正在考虑当中。

国内：

按照2001年实施的《人类辅助生殖技术管理办法》，中国的辅助生殖中心只允许为做试管婴儿的妇女冷冻卵子。允许做试管婴儿的妇女的条件包括：因子宫内膜异位症、子宫腺肌症、女方排卵困难、女性输卵管不通/堵塞、男性少精、男性弱精、女方卵巢功能衰竭、免疫性不孕等情况引起的不孕不育。

实际操作中，申请人必须要身份证、结婚证、生育证明等‘三证’齐全，而且夫妻双方都要到场。未婚女性不在此列。

D. 冻卵会不会导致卵巢早衰？

出生时，女性卵巢内有10万颗原始卵泡，到了青春期，每个月两侧卵巢都会有10颗左右卵泡准备发育，但女性体内的激素只能够供应1-2颗卵泡发育成熟为卵子，所以，只有那个优势卵泡能继续发育为卵子，其他的卵泡就萎缩了。但使用促排卵药物时，人为补充足够多的激素，支持这10颗左右的卵泡都能发育成熟为卵子，从这个方面说，这并没有影响到卵巢正常的生理寿命。而在年龄较小的时候冷冻的卵子，无论是从数量上还是质量上，都是在延长女性生育年龄。

可以简单粗暴将促排卵过程理解为变废为宝。

取卵本身也并不会引发卵巢早衰，但在取卵手术前的FSH促卵泡生成素注射步骤（必要时候医生会增加注射LH及拮抗剂）存在一定OHSS（卵巢过度刺激综合征）的风险。

根据文献报道，20%~33% 的体外受精 (IVF) 周期发生轻度 OHSS，2%~6% 发生中度 OHSS，0.1%~0.2% 发生重度 OHSS。严重的卵巢过度刺激综合征可能导致包括胸腔积液、急性肾功能不全、静脉血栓形成等危及生命的症状出现。（重度才比较危险）[1]

OHSS 并发血栓的危险因子可分为原发性和继发性。

原发危险因子包括:

1. 年轻女性;

2．对 Gn 敏感的病史;

3．既往发生过 OHSS

4． PCOS多囊卵巢综合症 及独立的 PCOS 症状

另外，B超引导下经阴道取卵也是有风险的。手术过程中，子宫、膀胱、肠管、血管及其他卵巢周围的盆腔结构，还是可能被损伤，如果创伤严重，可能还需开腹修补损伤。另外，手术还可能造成卵巢急性损伤、出血、感染、甚至不孕。只不过这类严重并发症的发生率很低，在1‰-2‰。[2]

E. 冻卵再解冻有多少比例卵子可以复苏？

这个问题比较复杂，目前还没找到单独关于冻卵再解冻卵子复苏比例的精准资料，美国疾病控制与预防中心CDC官网和美国辅助生殖技术学会SART官网公布的数据里只有美国各个州的辅助生殖机构只有最终受精成功婴儿的活产率而没有单独的卵子冷冻复苏数据可以查阅。

因为卵子直径达到0 .1毫米的卵子细胞，是人体内最大的细胞。女人的一生也只有300~400个卵子，而且卵细胞的形态和结构复杂，对低温特别敏感，冷冻和复苏过程可能会造成脆弱娇嫩的卵子超微结构的损伤，卵子冷冻再解冻会有折损。不过根据媒体公开的报道，冷冻卵子的复苏率有70%-80%，但这跟负责解冻的实验室团队息息相关，一些好的诊所可以做到90%以上。

F． 解冻的冻卵质量和新鲜卵子比受精概率会降低吗？不同年龄的女生为了保证活产率，各需要冻卵多少颗？

只要能够成功解冻并不会，但解冻后的受精的一系列过程都是医院实验室的核心技术体现，差的实验室从冻卵到最后活产可能30%的概率都不到，好的医院可以做到活产率60%-70%.

“而根据美国冷冻卵子机构的数据，38岁女性冷冻卵子的解冻复苏率及之后的受孕率大致都为75%。也就是说，如果冷冻了10颗卵子，那解冻后复苏的大概只有7颗，能成功受精发育为胚胎的有5-6颗，而为了保证受孕成功，通常会移植3-4个胚胎。这也是为什么做一次人工受精通常要存储10颗卵子。另外，解冻复苏率和受孕率也受卵子自身质量的影响。”

每个人和年龄的卵子质量、医院实验室水平都大相径庭，通常来说在实验室靠谱自己身体条件也靠谱的情况下，至少20-30颗卵子最后能保证1个成功的活产。

G． 冻卵到生娃还有几步？

内膜准备——胚胎移植——卵子解冻复苏——卵子受精处理——实验室培养囊胚——PGS/PGD筛查（美国比较严格）——生

其中培养囊胚又有如下步骤——

·取卵取精几个小时后，通过单精子注射术让成熟的卵子受精，一般把这一天定为第0天；

· 接下来第1天，过夜后上午观察卵子是否受精（是否有两个原核）；

· 第2天，观察受精卵是否分裂，是几细胞（4细胞最好），是否有碎片（没有碎片好），是否对称（对称的好）；

· 第3天，同第2天，看是几细胞（6－8细胞视为合格细胞），看是否有碎片和是否对称；

· 第4天，胚胎发育到桑椹胚阶段；

· 第5天，胚胎发育到囊胚阶段；

· 第6天，有的胚胎继续发育到囊胚。

冻卵跟这些后续步骤相比其实是非常简单的操作了，后面的养囊等步骤才是诊所最核心的竞争力所在，因为这是一件不是胜利就是失败的工作，没有中间结果，也因此很多女生都会做好几个周期

H. 冻卵的具体步骤有哪些？

AMH、激素六项、卵泡基础检查等合格后，去就诊医院后的步骤大概是这样几步——

促排卵治疗——（FSH卵泡生成素的注射），月经2-3天开始，治疗周期9-12天；

夜针注射——当数个主导卵泡平均直径到达 18 毫米后，医生会在当天为意向母亲注射一剂 HCG.

注射后的35.5小时医生会安排取卵手术。

取卵手术的步骤是：

1. 麻醉。 全身麻醉，一般美国医院用的是一种叫丙泊酚的液体，多见于胃镜麻醉时临床常用。

2. 取卵。

手术全程由阴道B超引导下进行。与平日检测卵泡的B超不同的是，B超探头上多了一个穿刺架装置，该装置就是为了固定卵泡穿刺针并确保穿刺针通过适宜的路径刺入卵泡。穿刺针的尾部连接的是带有无菌试管的负压吸引装置，针尖刺入卵泡内以后，医生控制负压吸引装置，将卵子连同卵泡液一起吸引到试管中。

3. 冷冻。

卵子被取出后，会立即被送往胚胎实验室，胚胎专家会对所有卵子进行冷冻前的观察及处理。在取卵后的十二个小时内，胚胎专家会对完全成熟的卵子进行玻璃化冷冻。

对没有完全成熟的卵子，有些医院还会有胚胎专家会对卵子进行 IVM（未成熟卵子的体外成熟培养技术）至完全成熟后，再进行冷冻。卵子会被冷冻保存于零下 196 度以下的液氮罐中。

I. 到底去哪里冻卵？

目前冻卵合法的地区非常多，美国、泰国、俄罗斯、英国、日本、香港、台湾都是成熟技术国家及地区。

如果你短期内计划生育，身体在生育范围内，那么以上国家和地区则都可以，因为解冻后的卵子或者受精卵都会移植回自己的身体。

但如果不计划短期内生育，或身体不在生育能力范围内，比如我这种，则需要考虑目的地国家是否DAI YUN 合法。目前合法的国家是美国和俄罗斯。

J. 怎么选择靠谱的医院和医生？

因为我选择的目的地是美国，因此我主要查阅了CDC和SART各个诊所的公开数据，然后查阅了各个诊所主要医生及实验室团队负责人公开发表的文献，因为冻卵储备时间未知，因此医院够不够大、经营够不够稳健也比较重要——经济周期来的时候能不能抗风险经营以保证你冻的卵能稳定在这待着。田野调查也做了，主要是用人脉关系找到了各个医院的中国股东及他们的合作方比如中介，实名问做过业务的中介哪个医生数据最好、股东口碑最好，基本上就是这些。

特别感谢【安心健康、优孕行、FSAC】及不愿具名的朋友们提供的技术、数据及咨询帮助与大力支持。

参考资料：

生殖医学空间：冻卵和冻胚是一回事吗？

胚胎及卵母细胞的冷冻保存技术，宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，王燕蓉

太平洋升值医学网

引用文献：

[1] 卵巢过度刺激综合征发病机制研究进展 ，董朝彤 综述 薛 晴 审校* 北 京 大 学 第 一 医 院 (100034) ，中 国 计 划 生 育 学 杂 志 2017 年 11 月 第 25 卷 第 11 期 Chin J Fam Plann，Vol.25，No.11，November 2017 P791

[2] 徐静蕾选择了冷冻卵子，但你会吗？，果壳网，

今天用的歌是林子祥版本的《孤独的手风琴》。

这是1947的苏联歌曲，至今仍在俄罗斯广为流传。林子祥版本有别样味道，我是从一个小朋友那里听到，一听就爱上了。

晚安。

听说漂亮的你一直在偷看我

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